药学论文_黄绵马酸BB联合红霉素抑制表皮葡萄球

文章目录

1 材料

1.1 药品

1.2 仪器

1.3 菌株

2 方法

2.1 黄绵马酸BB与红霉素的抗菌活性测定

    2.1.1 最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）的测定

    2.1.2 联合用药的部分抑菌浓度指数（fractional inhibitory concentration idex,FICI）的测定

2.2 黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株时间杀菌曲线的测定

2.3 黄绵马酸BB和红霉素抗生物被膜活性的测定

2.4 黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜清除作用的测定

    2.4.1 XTT比色法测定黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜内细菌代谢活性的影响

    2.4.2 半定量黏附实验测定黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜总量的影响

    2.4.3 SEM观察黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜微观结构的影响

2.5 黄绵马酸BB联合红霉素对生物被膜形成相关基因表达的影响

2.6 统计学分析

3 结果

3.1 黄绵马酸BB与红霉素单独用药和联合用药的抗菌活性

3.2 黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株时间杀菌曲线的影响

3.3 黄绵马酸BB与红霉素单独用药和联合用药的抗生物被膜活性

3.4 黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜的清除效果

    3.4.1 黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜内细菌代谢活性的影响

    3.4.2 黄绵马酸BB联合红霉素对受试菌株生物被膜总量的影响

    3.4.3 SEM观察受试菌株生物被膜微观结构的变化

3.5 黄绵马酸BB联合红霉素对生物被膜形成相关基因表达的影响

4 讨论

文章摘要:目的 探讨黄绵马酸BB与红霉素联用对表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis,SE）抑菌活性和生物被膜形成的作用,为黄绵马酸BB开发成为一种新型的生物被膜抑制剂提供理论基础。方法 采用微量稀释法分别测定黄绵马酸BB与红霉素联用对11株SE的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,并采用微量棋盘稀释法测定联合用药的部分抑菌浓度指数（fractional inhibitory concentration index,FICI）与最低抑膜浓度（minimum biofilm inhibitory concentration,MBIC）;采用时间-杀菌曲线法,评价联合用药对SE的动态杀菌作用;通过二甲氧唑黄[2.3-bis（2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl）-5-[carbonyl（phenylamino）]-2H-tetrazolium hydroxide,XTT]比色法、半定量黏附实验和扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）观察,评价联合用药对生物被膜形成各阶段的清除作用;采用qRT-PCR技术检测生物被膜形成相关基因表达的变化,探索联合用药可能的分子机制。结果 黄绵马酸BB与红霉素联用的FICI为（0.51±0.00）～（0.75±0.05）,表现为相加作用;联合用药对受试菌呈动态抑制和杀灭作用,整体呈相加作用;生物被膜形成的各阶段,联合用药组均可显著抑制受试菌的代谢活性及生物被膜总量的形成,并减少细菌量及胞外聚合物的形成。联合用药组在耐药菌株SE04的生物被膜形成的各阶段均下调基因aap及sarA的表达,并上调基因agrA的表达;对于敏感菌株SE08,在生物被膜形成的各阶段均下调aap、sarA的表达,在黏附及聚集期上调agrA的表达。结论 黄绵马酸BB与红霉素联用可以有效抑制SE及其生物被膜的形成,并呈相加作用。抗生物被膜效应与抑制细菌代谢活性、生物被膜总量以及生物被膜形成相关基因的表达有关。

文章关键词:

论文分类号:R965

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